Amidasa (AMD)
Enzimas:Son catalizadores biológicos macromoleculares, la mayoría de las enzimas son proteínas
Amidasa:Catalizar la hidrólisis de diversas amidas aromáticas y alifáticas endógenas y foráneas mediante la transferencia de un grupo acilo al agua con la producción de ácidos libres y amoníaco.Los ácidos hidroxámicos y otros ácidos orgánicos se usan ampliamente como fármacos porque son constituyentes de factores de crecimiento, antibióticos e inhibidores de tumores.Las amidasas se pueden dividir en acilasas de tipo R y tipo S según la estereoselectividad del catalizador.
Además de catalizar la hidrólisis de amidas, la amidasa también puede catalizar reacciones de transferencia de acilo en presencia de cosustratos como la hidroxilamina.
Las amidasas con diferentes fuentes tienen diferente especificidad de sustrato, algunas de ellas solo pueden hidrolizar amidas aromáticas, algunas de ellas solo pueden hidrolizar amidas alifáticas y algunas hidrolizan α-o ω-aminoamidas.La mayoría de las aminas tienen una buena actividad catalítica solo para las amidas aromáticas simples o acíclicas, pero para las aromáticas complejas, las amidas heterocíclicas, especialmente las amidas con sustituyentes orto, generalmente tienen una actividad baja (solo unas pocas enzimas exhiben mejores efectos catalíticos).
Mecanismo catalítico:
| Enzimas | Código de producto | Código de producto |
| polvo de enzima | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un conjunto de 19 amidasas, 50 mg cada 19 elementos * 50 mg/elemento u otra cantidad |
| Kit de detección (SynKit) | ES-AMD-1900 | un conjunto de 19 amidasas, 1 mg cada 19 artículos * 1 mg / artículo |
★ Alta especificidad de sustrato.
★ Fuerte selectividad quiral.
★ Alta eficiencia de conversión.
★ Menos subproductos.
★ Condiciones de reacción suaves.
★ Respetuoso con el medio ambiente.
➢ La selección de enzimas debe llevarse a cabo para sustratos específicos debido a la especificidad del sustrato y obtener una enzima que catalice el sustrato objetivo con el mejor efecto catalítico.
➢ Nunca entrar en contacto con condiciones extremas tales como: alta temperatura, pH alto/bajo y solvente orgánico con alta concentración.
➢ Normalmente, el sistema de reacción debe incluir sustrato, solución tampón (el pH óptimo de reacción de la enzima).Los cosustratos como la hidroxilamina deben estar presentes en el sistema de reacción de transferencia de acilo.
➢ El AMD debe agregarse en último lugar al sistema de reacción con un pH y una temperatura de reacción óptimos.
➢ Todos los tipos de AMD tienen varias condiciones óptimas de reacción, por lo que cada uno de ellos debe estudiarse más a fondo individualmente.
Ejemplo 1(1):
Actividad de hidrólisis a diferentes sustratos de amida
| Sustrato | Actividad específica µmols min-1mg-1 | Sustrato | Actividad específica µmols min-1mg-1 |
| Acetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| lactamida | 12.8 | ο-NUEVA HAMPSHIRE2benzamida | 1.0 |
| butiramida | 11.9 | p-NUEVA HAMPSHIRE2benzamida | 0.8 |
| Isobutiramida | 26.2 | ο-Toluamida | 0.3 |
| Pentanamida | 22.0 | p-Toluamida | 8.1 |
| Hexanamida | 6.4 | Nicotinamida | 1.7 |
| ciclohexanamida | 19.5 | Isonicotinamida | 1.8 |
| acrilamida | 10.2 | picolinamida | 2.1 |
| Metacrilamida | 3.5 | 3-fenilpropionamida | 7.6 |
| prolinamida | 3.4 | Indol-3-acetamida | 1.9 |
| Benzamida | 6.8 |
La reacción se llevó a cabo en solución tampón de fosfato de sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| amidas | Hidroxilamina | hidracina |
| Acetamida | 8.4 | 1.4 |
| propionamida | 18.4 | 3.0 |
| Isobutiramida | 25,0 | 22.7 |
| Benzamida | 9.2 | 6.1 |
La reacción se llevó a cabo en solución tampón de fosfato de sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentración de reactivo relacionado: amidas, 100 mM (benzamida, 10 mM);hidroxilamina e hidrazina, 400 mM;enzima 0,9 μM.
Ejemplo 2(2):
Ejemplo 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremófilos, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Bioquímica de procesos, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Química bioorgánica, 2017, disponible en línea 7.
