Amidasa (AMD)
Enzimas:Las enzimas son catalizadores biológicos macromoleculares, la mayoría de las cuales son proteínas.
Amidasa:Catalizan la hidrólisis de diversas amidas alifáticas y aromáticas, tanto endógenas como exógenas, transfiriendo un grupo acilo al agua y produciendo ácidos libres y amoníaco. Los ácidos hidroxámicos y otros ácidos orgánicos se utilizan ampliamente como fármacos, ya que son componentes de factores de crecimiento, antibióticos e inhibidores tumorales. Las amidasas se pueden clasificar en acilasas de tipo R y de tipo S según la estereoselectividad del catalizador.
Además de catalizar la hidrólisis de amidas, la amidasa también puede catalizar reacciones de transferencia de acilo en presencia de cosustratos como la hidroxilamina.
Las amidasas de diferentes orígenes presentan distinta especificidad de sustrato: algunas solo hidrolizan amidas aromáticas, otras solo amidas alifáticas y otras amidas α- o ω-amino. La mayoría de las aminas muestran buena actividad catalítica únicamente para amidas aromáticas simples o acíclicas, pero para compuestos aromáticos complejos, las amidas heterocíclicas, especialmente las que presentan sustituyentes en posición orto, suelen tener baja actividad (solo unas pocas enzimas exhiben mejores efectos catalíticos).
Mecanismo catalítico:
| Enzimas | Código de producto | Código de producto |
| Polvo de enzimas | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un conjunto de 19 amidasas, 50 mg cada una 19 artículos * 50 mg / artículo, u otra cantidad |
| Kit de cribado (SynKit) | ES-AMD-1900 | un conjunto de 19 amidasas, 1 mg cada una 19 artículos * 1 mg / artículo |
★ Alta especificidad de sustrato.
★ Fuerte selectividad quiral.
★ Alta eficiencia de conversión.
★ Menos subproductos.
★ Condiciones de reacción suaves.
★ Respetuoso con el medio ambiente.
➢ Se debe realizar una selección de enzimas para sustratos específicos debido a la especificidad del sustrato, y obtener una enzima que catalice el sustrato objetivo con el mejor efecto catalítico.
➢ Nunca exponer a condiciones extremas como: altas temperaturas, pH alto/bajo y disolventes orgánicos de alta concentración.
➢ Normalmente, el sistema de reacción debe incluir sustrato y solución tampón (con el pH óptimo de reacción de la enzima). En el sistema de reacción de transferencia de acilo deben estar presentes cosustratos como la hidroxilamina.
➢ El AMD debe agregarse al final al sistema de reacción con el pH y la temperatura de reacción óptimos.
➢ Todos los tipos de AMD tienen diferentes condiciones de reacción óptimas, por lo que cada uno de ellos debe estudiarse individualmente.
Ejemplo 1(1):
Actividad de hidrólisis frente a diferentes sustratos de amida
| Sustrato | Actividad específica μmoles/min-1mg-1 | Sustrato | Actividad específica μmoles/min-1mg-1 |
| acetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| Propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Lactamida | 12.8 | ο-NUEVA HAMPSHIRE2benzamida | 1.0 |
| Butiramida | 11.9 | p-NUEVA HAMPSHIRE2benzamida | 0,8 |
| isobutilamida | 26.2 | ο-Toluamida | 0,3 |
| Pentanamida | 22.0 | p-Toluamida | 8.1 |
| Hexanamida | 6.4 | Nicotinamida | 1.7 |
| Ciclohexanamida | 19.5 | isonicotinamida | 1.8 |
| acrilamida | 10.2 | Picolinami | 2.1 |
| Metacrilamida | 3.5 | 3-fenilpropionamida | 7.6 |
| Prolinamida | 3.4 | Indol-3-acetamida | 1.9 |
| Benzamida | 6.8 |
La reacción se llevó a cabo en una solución tampón de fosfato de sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| Amidas | Hidroxilamina | Hidracina |
| acetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamida | 18.4 | 3.0 |
| isobutilamida | 25.0 | 22.7 |
| Benzamida | 9.2 | 6.1 |
La reacción se llevó a cabo en una solución tampón de fosfato de sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentración de reactivos relacionados: amidas, 100 mM (benzamida, 10 mM); hidroxilamina e hidrazina, 400 mM; enzima 0,9 μM.
Ejemplo 2(2):
Ejemplo 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremófilos, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Química bioorgánica, 2017, Disponible en línea 7.
